2.1.2.3 糖蛋白SEG-2对LPS诱导得RAW264.7细胞炎症因子表达的发芽分析影响

糖蛋白SEG-2对LPS诱导的RAW264.7细胞炎症因子表达如图4所示。

由图4可知，糙米小鼠巨噬细胞RAW264.7经过1μg/mL的糖蛋LPS催化刺激后，较空白组而言，白抗4种炎症因子iNOS、炎降COX-2、血糖性TNF-α及IL-1βmRNA相对表达水平都有显著上升（P＜0.05），发芽分析分别升至0.918，糙米0.965，糖蛋1.084和0.927。白抗低剂量的炎降SEG-2对炎症因子COX-2、TNF-α的血糖性mRNA相对表达水平下降效果显著（P＜0.05），对炎症因子iNOS和IL1β的发芽分析mRNA表达下调效果极显著（P＜0.01），中、糙米高剂量的糖蛋SEG-2对TNF-α、COX-2的mRNA下调效果显著（P＜0.05），对炎症因子iNOS和IL-1的mRNA表达下调效果极显著（P＜0.01），相对表达水平最低降至0.148，0.387，0.566和0.237。

2.2 GBRG的降血糖作用研究结果分析

2.2.1 各组分GBRG对α-葡萄糖苷酶抑制活性的结果分析

各组分GBRG对α-葡萄糖苷酶抑制率的测定结果如图5所示。

由图5可知，3种GBRG组分均具有一定的α-葡萄糖苷酶的抑制效果。水洗糖蛋白WEG对α-葡萄糖苷酶的抑制效果最弱，抑制率为36.67%；盐洗糖蛋白SEG-1对α-葡萄糖苷酶的抑制效果强于WEG，抑制率为52.27%；SEG-2对α-葡萄糖苷酶的抑制效果最强，抑制率高达65.71%。表明SEG-2组分中的酶抑制物质的含量最高。

2.2.2 SEG-2的α-葡萄糖苷酶抑制率及半数抑制浓度的测定结果分析

SEG-2对α-葡萄糖苷酶的抑制作用的结果如图6所示。

由图6可知，质量浓度在0～0.6mg/mL的范围内，SEG-2抑制α-葡萄糖苷酶的能力随SEG-2浓度的增加而提高。其浓度与抑制率呈线性相关关系，回归方程为Y=58.97X+23.064，R=0.9905，求其IC50是0.46mg/mL。在0.6～1.0mg/mL范围内，随着SEG-2浓度的增大，α-葡萄糖苷酶抑制率较平缓，在0.6mg/mL时，SEG-2对α-葡萄糖苷酶抑制率与对照组最为接近。因此，糖蛋白SEG-2在整体上具有良好的酶抑制活性，并且在0.6mg/mL的质量浓度下抑制效果最佳。

2.2.3 各组分GBRG对α-淀粉酶抑制活性的结果分析

各组分GBRG对α-淀粉酶抑制率的测定结果如图7所示。

由图7可知，3种GBRG组分均对α-淀粉酶有较强的抑制效果。水洗糖蛋白WEG抑制α-淀粉酶的能力最弱，抑制率为52.5%；盐洗糖蛋白SEG-1抑制α-淀粉酶的能力弱于SEG-2，抑制率为58.5%；而SEG-2抑制α-淀粉酶的能力最强，抑制率可达64.5%。尽管3种糖蛋白对α-淀粉酶有所抑制，但总体上稍弱于阿卡波糖。

2.2.4 SEG-2的α-淀粉酶抑制率及半数抑制浓度的测定结果分析

SEG-2对α-淀粉酶的抑制作用的结果如图8所示。

如图8所示，在质量浓度处于0～1mg/mL范围内，SEG-2的α-淀粉酶抑制率与糖蛋白浓度成正比例关系。当质量浓度为1mg/mL时，SEG-2的抑制率可达到54.26%。一定范围内，抑制率与SEG-2浓度呈线性相关，其回归方程为Y=39.074X+14.36，R=0.9962，求得IC50为0.912mg/mL。SEG-2与阿卡波糖的抑制能力均随浓度的增加而不断提高，表明糖蛋白SEG-2具有较好的α淀粉酶抑制能力，但弱于阿卡波糖。

3 结论

天然植物糖蛋白不仅具有广泛的抗肿瘤和抗氧化能力，还能增强人体免疫力，抑制细菌生长，调节机体大部分的生命活动。大多数蛋白质是糖蛋白。本试验以GBRG为原料，研究其抗炎、降血糖作用。Li等发现莲子糖蛋白可以有效抑制炎症因子NO的产生，抑制经LPS刺激后的小鼠巨噬细胞RAW264.7中炎症介质的产生。夏炎等发现，蒲公英糖蛋白可以通过调控NF-κB信号的转导通路，显著抑制TNF-α和IL-6的分泌及TNFα、IL-6和iNOSmRNA的表达以及NO的合成，从而发挥其抗炎作用。乔春雷从淫羊藿中提取的糖蛋白可抑制与血糖代谢相关酶的活性，并对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉的抑制作用呈剂量依赖性；刘主等从甘薯中提取的糖蛋白可对经四氧嘧啶诱导后的糖尿病患病小鼠有较强的降血糖作用。

本文通过试验手段，分离纯化所提取的GBRG，获取不同的3种糖蛋白组分WEG、SEG-1和SEG-2。对这3种糖蛋白进行经LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7抗炎症试验和α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶的抑制能力测定，筛选出具有良好降血糖作用和抗炎症能力的糙米糖蛋白WEG-2，为补充或代替化学药物的深度开发提供参考，同时对促进我国农业和稻谷的可持续发展具有重大意义。但对GBRG的深入研究还有很长的科研之路要走，依旧要利用更高端的设备与科技来开展全方面的探析，便于更全面地发挥出GBRG的有益作用。

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